外泌體 ( exosomes) 是如何製造出來的?開箱直擊外泌體製造工廠!

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外泌體 ( Exosome ) 廠牌那麼多,如何選擇才不會踩雷?皮膚科林政賢醫師三招教你分辨外泌體好壞!

這次去韓國首爾,除了參加再生美容外泌體高峰會之外,另一個重要的活動,就是要去參觀、開箱 ExoCoBio 這家外泌體公司。這家公司有兩個工廠,一間比較小型,位在首爾市區的辦公大樓,目前大多數的產品,都是出自那裡。

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那另一個,是位在五松區 (Osong),距離首爾,大概有將近兩個小時的車程,是未來產能擴大時,或是在生產醫療等級的外泌體時,會用到的地方。不過當天實在是太早起,所以一上車,就準備進入昏睡模式。

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這家工廠位在一個科學園區,是國家提供各種優惠,獎勵投資的產業。整個建築體非常大。一樓是主要的工廠區,二樓則主要是簡報室,辦公室,還有員工餐廳。員工餐廳是 buffet 型式,有儘量符合各國的飲食需求,因為他們的員工,是來自世界各地的。

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這次和我同一團參訪的,有來自巴西、菲律賓的,還有西班牙等等各國的醫師。經過這次參觀,我才知道,原來外泌體的製造過程,非常複雜,而且非常嚴謹。這種嚴謹,在我一開始踏進這家 ExoCoBio 公司時,就立刻感受到了,因為不管你是董事長,還是一般的訪客,只要走進這家公司,就一定要戴鞋套,來避免把細菌或病毒帶進去,污染產品。另外,整間公司的溫度和濕度,也都有嚴格的調控。

一開始,我們先聽取這家公司 CEO 的簡報。這位 CEO 其實非常忙碌,他每個月都要在全世界各地飛來飛去,在醫學會議上,發表好幾場他們家的外泌體,相關的醫學研究報告。

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我當然也有和他合影留念一下。

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他在簡報中提到, ExoCoBio 是目前全世界前三大外泌體製造廠之一,他們在研發方面,投注了相當大量的資金。目前以他們家的外泌體為研究素材,已經發表或正在投稿中的學術論文,就高達 17 篇,應該是全世界中,非常學術的一家公司,科學証據非常充分。

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另外,他也提到,他們其中一個育髮產品,甚至得到 今年 2023 年,AMWC 世界美容醫學高峰會的「最佳保養品」的大獎。

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接著,就是參觀整個外泌體製造的流程。總結起來,整個外泌體的製造過程,大致上分成幾個步驟。

 

外泌體 ( Exosome ) 製程一:來源及儲存

上篇文章有提到,若想要從幹細胞提取出天然的外泌體,就要從人體、其他動物,或是植物,找到有幹細胞的器官或組織。所以,如果想要獲要獲得脂肪來源的間質幹細胞,就要取得人體的脂肪。所以像抽脂手術抽出的脂肪,就是一個很好的來源。

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那拿到這些脂肪後,就會先儲存在零下196度C的液態氮筒裡面保存,也就是所謂的 cell bank,細胞銀行。 ExoCoBio 這家公司的幹細胞來源,主要有兩個,一個是人類的脂肪,一個是植物來源的大馬士革玫瑰。那這裡有好幾個 cell banks ,也就是專門儲存細胞的銀行。

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每個 cell bank 儲存筒,可以儲存大約9000個大儲存罐。每個大儲存罐,又可以存大概一萬個小儲存罐。所以,他們的產量實在非常大,難怪 ExoCoBio 可以成為世界三大外泌體製造廠之一。

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外泌體 ( Exosome ) 製程二:細胞培養

光拿到這些脂肪細胞還不夠,因為裡面的幹細胞數量實在太少了,很難製造出大量的外泌體,所以還要把這些最原始的幹細胞,我們叫 master cells ,經過培養,把細胞的數量放大,變多,這樣才能產出大量的外泌體。

那培養的方式,各家廠商當然就有各種不同的方法,培養的配方也不同,這些都是廠商的 know-how ,都是高度的機密,目的就是讓這些幹細胞的數量更多,品質又能兼顧到。

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外泌體 ( Exosome ) 製程三:萃取及純化

接下來就是重頭戲了。因為我們只想要得到這些幹細胞所分泌出來的外泌體,其他的東西通通都不要,所以要如何去掉細胞中的其他東西,包括細胞膜、細胞核,篩選一大堆細胞裡的雜質,甚至實驗室培養皿裡面的養分,細胞新陳代謝後的廢棄物,通通都要去掉,而且要去得很乾淨。

什麼是外泌體?exosomes 對皮膚有何神奇功效?

因為這些雜質,有可能會造成人體的過敏,甚至對人體有毒性。所以,各家廠商就會發明出各式各樣的萃取和純化的方法,而且通常是列為最高的商業機密。所以我這次在參觀 ExoCoBio 這家工廠時,在這個萃取和純化的重點區域,是不能拍照的,只能遠遠地看,聽解說員講解。

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而且喔,雖然有的萃取方法很好,可以得到高純度的外泌體,但是有的機器的成本很高,有的則是步驟太繁瑣,太耗時間,不符合經濟效益。所以要如何兼顧提取的有效率和商業成本,就是各家公司的重點,也是競爭力所在。

這也就是為什麼,有的外泌體比較貴,有的卻很便宜,有一部分,就是反應了製造的成本,還有萃取出來的純度。當然,也由於這些萃取及純化技術的困難,這也就是為什麼,外泌體保養品的價格,會高過於一般保養品的原因。

 

外泌體 ( Exosome ) 製程四:嚴格品管

產品製造出來後,接著就要確認產品的品質如何。

這個階段也很關鍵。因為你提取出了一大堆的囊泡,但就像我在上一篇文章有提到,有的其實只是微囊泡,有的則是凋亡小體,根本不是外泌體,或者是提取出來的外泌體,大小不一,品質不穩定。

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所以像 ExoCoBio 這家公司,它就有一個品管的部門,有各式各樣的儀器,來抽樣檢測所提取出來的外泌體的品質。這裡的儀器,我大多不認識它,大概要唸化學分析的人才會懂。

像他們 ExoCoBio 這篇發表在頂尖醫學期刊 Cells 的論文,探討外泌體在異位性皮膚炎上的應用。它論文裡就有去証明說,他們的外泌體大小,尺寸很集中一致,不會說大大小小都有。

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另外,我們上一篇文章也有提到,外泌體表面上特有的蛋白質,包括 CD9, CD63, CD81 等等,也都有檢測出來,証明它們的是貨真價實,品質很一致的外泌體。

當然,要檢測的項目還不止這些,包括像有沒有其他的雜質或是微生物殘留,也都是品管的一部分。不然有的公司製造出來的外泌體,可能品管不好,就容易過敏,甚至有細菌的污染。或是有的雖然萃取出來的外泌體數量很多,但是其實很多都是空包彈,用了大概就不會有什麼效果。

 

外泌體 ( Exosome ) 製程五:充填及保存

最後,製造出來的外泌體,就要充填成一罐一罐的,並且存放在倉儲中,之後再通過物流,送到消費者手中。

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那我參觀的 ExoCoBio 這家公司,它不只是一般的保養品公司,它的整個製程,其實是符合 GMP 藥廠等級的規範。大家要知道,藥是要吃進人體,或是打進人體的,所以 GMP 的要求非常嚴格。

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也就是說,它是用製造醫療級藥品的高規格,來生產標準比較那麼嚴格的保養品或化妝品。那製造出來的外泌體產品,如果是醫療等級的,也就是打進人體內的,液體就要儲存在零下20℃的低溫中。

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但如果是保養品等級的外泌體,就可以儲存在比較高的溫度,大概是 2-8℃之間。

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以上就是我這次參觀 ExoCoBio 這家韓國外泌體製造廠的整理。台灣其實也有一些不錯的外泌體廠商,有機會的話,我再來幫大家開箱介紹一下。每家廠商的規模大小可能都不太一樣,製造流程的細節,也會有所不同,不過大致上,大方向的流程都是類似的。

 

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